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　　小鼠ATP结合盒转运体G1（ABCG1）ELISA试剂盒本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中小鼠ATP结合盒转运体G1（ABCG1）的含量。有效期：6个月保存条件：2-8℃本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被小鼠ATP结合盒转运体G1（ABCG1）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠ATP结合盒转运体G1（ABCG1）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。样本处理及要求1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2-8°C1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。3.组织匀浆：用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶YZ剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。Z后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。4.细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。注：标本溶血会影响Z后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。标本处理1.本公司只对试剂盒本身负责，不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责，请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量，预留充足的样本。2.实验前应预测标本含量，如果标本浓度过高，应对标本进行稀释，使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。3.若所检样本不包含在说明书所列样本之中，建议进行预实验验证其有效性，并注意留存样本。4.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。5.若样本为细胞培养上清，因该类样本干扰因素较多，如：细胞状态、细胞数量、采样时间等，所以可能存在检测不出的情况。6.某些天然蛋白或重组蛋白，包括原核及真核重组蛋白，可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配，而不被检测出。7.建议使用新鲜样本，保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。需要而未提供的试剂和器材酶标仪（450nm）高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱蒸馏水或去离子水试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板8孔×12条8孔×6条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无备注：1.标准品浓度依次为：200、100、50、25、12.5、0pg/mL2.经过大量正常标本检验，标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内，实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过Zda标准品浓度时，可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。注意事项严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。在储存和温育时避免强光直接照射。平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。不能使用过期产品。如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。操作步骤从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。实验结果计算以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。试剂盒性能检测范围：6.25pg/mL200pg/mL。灵敏度：Zdi检测浓度小于1.0pg/mL。特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。重复性：板内变异系数小于10%，板间变异系数小于15%。说明1.由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析，本产品可能存在一定的质量技术风险。2.Z终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关，请务必准备充足的标本备份。3.不同批次的同一产品可能会有少许差别，如：检测限、灵敏度以及显色时间等，请依据试剂盒内说明书进行实验操作，网站电子版说明书仅作参考。4.只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果，不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到**的检测结果。问题解答若实验效果不好，请及时对显色结果拍照，保留所用板条及未使用试剂，并妥善保存，然后联系我公司技术支持为您解决问题。同时您也可以参考以下资料：问题可能原因解决方案标准曲线差吸取及洗涤不充分充分的吸取及洗涤移液不极ng确检查和校正移液器精密度低洗涤不充分按说明书要求充分洗涤和浸泡混匀不充分和吸取试剂不足充分混匀和吸取试剂重复利用吸头、容器和覆膜使用加样器要更换新的吸头、使用新的容器和覆膜加样不极ng确检查和校正移液器O.D值低每孔加的试剂量不极ng确校正移液器，极ng确加入试剂温育时间不正确保证充足的温育时间温育温度不正确试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度酶标记物或底物失效通过混合酶标记物和底物，颜色应迅速显现来检查没有加入终止液按照说明书实验操作步骤加入终止液超出读数时间读数在说明书推荐的读数时间内读数样本值不正确的样本储存方式正确储存样本，使用新鲜样本进行实验不正确的样本收集和处理方法采取正确的样本收集和处理方法待测物质在样本中含量低使用新鲜样本，重复实验[详细]

　　抗坏血酸（Vc)测试盒说明书（货号：HL00950T/48样）试剂盒组成及配制（50T/48样）：试剂一：液体10ml×1瓶，4℃保存6个月。用时加水至150ml，混匀，配成应用液。试剂二：粉剂×1支，4℃保存6个月。用时加1.8ml的冰醋酸再加水至200ml，4℃保存。试剂三：白色结晶体的粉剂×1支，4℃保存6个月。因较难溶解，在使用前2-4小时加95%酒精或无水乙醇60ml充分溶解，4℃保存。试剂四：黄色贮备液10ml×1瓶，冰箱4-8℃避光保存，贮存时间6个月。每次测定时取0.3ml贮备液加水试剂五：液体6ml×1瓶,4℃保存6个月。维生素C标准品：粉剂6mg×3支，每瓶内含维生素C，4℃避光保存6个月。6μg/ml标准品应用液的配制：将一支标准品溶于10ml的1号试剂应用液中，混匀后取0.1m再加1号试剂应用液至10ml，现用现配。注：维生素C标准品氧化，因此，**在样本上清液制备好后再配标准，并在10分钟内进行检测。本人内容由上海哈灵生物科技有限公司提供[详细]

　　1.BioAssaySystems产品分为两种类型，一种是仅含化学试剂，另外一种是含酶产品。产品编号以字母“E”开头，例如ECNP-100，就是一种以酶为基础的检测试剂盒。以字母“D”或其他字母（Q,C,P,S）开头的均属于化学试剂盒。2.含酶试剂盒的标识为EnzyChromTM、EnzyFluoTM，化学试剂盒的标识为QuantiChromTM或QuantiFluoTM等。3.产品编号中可看出测试样本数量。例如，尿素检测试剂盒（产品编号：＃DIUR-500）表示能利用96孔板进行500个样本的测试。检测试剂盒的大小，是指在标准的96孔板的检测总数。这个总数包含计算样本浓度所需的标准和对照总数（例如，标准曲线.只使用化学试剂的测试盒，在室温下是稳定的，并可以在常温下进行运输。收到货后，各成分应根据说明书中的保存方法进行保存。5.以酶为基础的测试盒（编号以字母“E”开头的）需要干冰运输，收到产品后，应冰冻保存(-0°C,-20°C更为理想).检测程序光密度（OD）测量，应使用透明的平底96孔板；荧光检测，建议使用黑色96孔板；发光检测，应使用不透明的白色96孔板。**步：将标准品和样品转移到96孔板的不同孔中。注：对于一个未知的样品，为谨慎起见，首先应在试验中测试一下不同稀释度的样品，以确保样品的浓度范围在线性检测范围内。此测试也能确定将来测试所需的适当的稀释倍数。第二步：根据实验所需,配备足够的工作试剂。将工作试剂按量加入标准品孔和样品孔中。第三步：在适当的温度下（通常为室温），按说明书要求的反应时间进行反应。第四步：读取光密度、荧光强度或发光强度。第五步：计算。根据样本和标准品的读数计算样品浓度。常见咨询问：检测测试盒能不能用于诊断目的呢？答：目前我们所有的检测试剂盒仅用于研究使用，不能用于诊断目的。问：一个试剂盒可以测试多少次？答：测试总数可以在产品编号中找到。例如，肌酐检测试剂盒（目录＃DICT-500）指的是可以用96孔板测试500个样本。检测试剂盒的大小是指可检测样本的总数。这个总数包括样品、标准和参照（如标准曲线，样品空白等）。问：试剂盒有物种特异性吗？答：目前博世生物提供的生化检测试剂盒大多是没有种属特异性的，能用于人、小鼠、牛等样品的测试。在极少情况下,不同物种间的酶生化特性可能不完全相同。使用时可能需要做适当改变,例如pH值等。问：任何样品都可以使用吗？答：一般来说，通过适当的样品制备方法，我公司的试剂盒可检测包括生物、食品、饮料和环境等各类样品。通常情况下，待分析物应溶解于透明的水液中。博世生物的生化检测试剂盒既通过了与人类和小鼠的血清样品进行的实验验证，也通过了与其他样品如唾液、组织、尿液等的实验验证。问：我在哪里可以找到测试盒的保质截止日期？答：保质期取决于具体的试剂盒。请仔细阅读说明书或访问我们的的网站（。。ｃｏｍ），搜索您感兴趣的试剂盒，保质截止日期是从交付之日起计算。问：每个检测都需要做标准曲线吗？答：是的,建议这么做。问：检测试剂盒有荧光法和比色法。我应该使用哪种方法？答：**，这取决于您的设备是荧光光度计还是分光光度计。第二，荧光检测通常比比色法敏感10倍以上，这意味着，您可以用更少的样品就可以达到测试目的，如果在样本数量有限的情况下，使用荧光检测更为可取。问：我可以储存未使用的试剂供日后使用吗？答：未使用的试剂，可以根据说明书存储。但要避免重复冻结和解冻。问：什么是检测限度（LOD）和定量限度（LOQ），区别是什么？答：在化学分析中，检测限、检测下限、或LOD（检测限），是确定物质含量能与空白对照进行区分的Zdi浓度限度。检测限是通过空白对照的平均值，空白对照的标准偏差和其他定性因素来估算的。通常情况下，检测限为3×空白的标准偏差。定量限（LOQ）与LOD类似，但它是10×空白的标准偏差。问：为什么我测得的数据与说明书上的数据有些不同？答：读数可以是不同的，取决于许多因素：仪器（分光光度计、酶标仪）和板型（清晰、白色或黑色）和其几何形状（圆、方以及配件、过滤器或基于单色器、平面或V型底）和移液枪精度。因此，建议每次检测时，样品和标准品同时检测。仪器设备问：我没有96孔板酶标仪，可以使用分光光度计、比色皿吗？答：是的。我公司的测试盒可使用各类分光光度计或酶标仪、比色皿或微孔板，如96孔板、384孔板等，大多数检测可以扩展到不同的比色皿中测定。问：如何转换微孔板和比色皿的测试次数？答：转换取决于比色皿的大小以及在96孔板中测定的Z终体积。例如，DICT-500，在96孔板的Z终体积为205μL。对于1毫升的比色皿，五个孔相当于1比色皿体积。因此，在1毫升比色皿中，每个试剂盒检测次数将是500÷5=100次。如果使用体积小的比色皿（例如200μL体积），比色皿和96孔板的检测次数则相同。问：应使用什么样的检测板？答：对于比色法，应使用透明的平底板测光密度（OD）。荧光检测，建议使用坚实的黑色板。对于发光检测，则应使用不透明的白色板。问：该试剂盒说明书表明，应在550-620nm读数，但我Z接近的过滤器是540nm。我仍然可以使用我的酶标仪检测吗？答：建议在说明书规定的波长范围内进行检测，在给定的范围之外来测量，检测的灵敏度通常会变低。对于少数试剂盒，须在一个狭窄的波长范围内测量。问：我应该使用哪一种过滤器来测量发光？答：发光检测没有必要使用过滤器。样品制备问：我的样品是浑浊的，能用它吗？答：所有的Z终检测样品都应是清晰透明的、无沉淀物或颗粒。如果有颗粒，应该通过0.45微米的过滤器过滤或离心机（如5分钟14000转）去除。问：我今天无法进行样本检测。样品可以冰冻保存吗？答：原则上，应该使用新鲜制备的样品。不过贮存得当的话，多数样品是稳定的（例如，??在4、-20、-80℃或液氮中保存），这需要根据样品的性质决定。问：我应该使用血清还是血浆样本？答：一般来说，血清样品优于血浆样本，因为血清样品中没有抗凝血剂的存在。但我们的测试盒绝大多数都可用于血清或血浆样品。问：如果说明书没有描述，该如何准备细胞和组织样本，？答：根据不同的样本制备方法可能有不同。根据相关文献，以下是一般准则，可以在大多数情况下使用：组织样本：准备20-100mg组织，加入200-1000μL冰冷的PBS。通过均化或超声（**在冰水浴中进行）裂解样本。组织溶解的程度，可以通过显微镜检查；在14,000转条件下离心10分钟；将上清液转移到一个干净的管中。然后通过不同的稀释浓度来选择进一步检测中需要的标准曲线检测范围的稀释倍数。如果不立即检测，大多数样品可以在-80°C保存。细胞样本：在冰上将大约两百万（2×106）个细胞悬浮与400μLPBS。通过均浆化或超声（**在冰水浴中进行）处理可以裂解样本。在显微镜下检查细胞裂解程度。然后离心（转数：14,000转）10分钟。将上清液转移到一个干净的管中。然后通过不同的稀释度来选择进一步检测中需要的标准曲线检测范围的稀释倍数。如果不立即检测，大多数样品可以在-80°C保存。如果使用裂解液，为避免裂解液对实验的干扰，建议先进进行以下两种标准曲线O，（或缓冲液，根据所需数据表）并准备包含相同比例裂解液样本。如果这两个标准曲线是一样的，那么裂解液是没有干扰的。如果标准曲线有差异，但是裂解液标准曲线仍然保持线性，那么就需要使用含裂解液的标准曲线来计算样本浓度。问:分析应该使用多少样品？答：对于一个未知样品，检测前应评估**稀释倍数。准备不同稀释度的样本并选择处于检测范围的稀释倍数，**稀释倍数的读数位于标准曲线的中间。然后检测该稀释倍数的样本，结果乘以稀释倍数。订购，运输，收货以及储存问：有没有提供免费SY装或打折产品呢？答：在某些特殊情况下，我们可能会提供用于测试目的的折扣。[详细]